CTAB-PAGE

Die CTAB-PAGE ist eine biochemische Methode zur Trennung von Proteinen nach ihrer Molmasse in einer Polyacrylamid-Gelelektrophorese (PAGE) unter Verwendung des Tensids Cetyltrimethylammoniumbromid (CTAB).[1]

Eigenschaften

Die CTAB-PAGE eignet sich zur Trennung von Proteinen mit vielen positiven Ladungen oder glykosylierten Membranproteinen.[2][3][4] Im Gegensatz zur üblicherweise verwendeten SDS-PAGE wandern die mit dem kationischen Tensid CTAB beladenen Proteine zur Kathode (Minus-Pol). Alternativ kann als PAGE mit kationischem Tensid die BAC-PAGE mit 16-Benzyldimethylhexadecylammoniumchlorid (16-BAC) anstelle von CTAB verwendet werden.[5] Wenn die Proben mit dem Probenpuffer nicht erhitzt werden und kein Reduktionsmittel für Disulfidbrücken wie Mercaptoethanol, Dithiothreitol oder Dithioerythritol zugesetzt wurde, bleibt teilweise die native Konformation und biologische Aktivität der Proteine erhalten.

Einzelnachweise

  1. ↑ R. J. Braun, N. Kinkl, M. Beer, M. Ueffing: Two-dimensional electrophoresis of membrane proteins. In: Analytical and bioanalytical chemistry. Band 389, Nummer 4, Oktober 2007, S. 1033–1045, doi:10.1007/s00216-007-1514-6, PMID 1768023.
  2. ↑ Engelbert Buxbaum: Cationic electrophoresis and electrotransfer of membrane glycoproteins. In: Analytical Biochemistry. Bd. 314, Nr. 1, 2003, S. 70–76, PMID 12633604, doi:10.1016/S0003-2697(02)00639-5.
  3. ↑ Dianne T. Akin, Raymond Shapira, Joseph M. Kinkade Jr.: The determination of molecular weights of biologically active proteins by cetyltrimethylammonium bromide-polyacrylamide gel electrophoresis. In: Analytical Biochemistry. Bd. 145, Nr. 1, 1985, S. 170–176, PMID 4003759, doi:10.1016/0003-2697(85)90343-4.
  4. ↑ R. J. Simpson: CTAB-PAGE. In: Cold Spring Harbor protocols. Band 2010, Nummer 4, April 2010, S. pdb.prot5412, doi:10.1101/pdb.prot5412, PMID 20360366.
  5. ↑ Joachim Hartinger, Katinka Stenius, Dagmar Högemann, Reinhard Jahn: 16-BAC/SDS-PAGE: a two-dimensional gel electrophoresis system suitable for the separation of integral membrane Proteins. In: Analytical Biochemistry. Bd. 240, Nr. 1, 1996, S. 126–133, PMID 8811889, doi:10.1006/abio.1996.0339.